Acte I

Alexandre le Grand, l’Empereur de Macédoine, est aux portes de la ville d’Oxydraque. Aidé du Prince Leonato, il fait tomber les murailles de la ville. Alexandre vante son audace qui lui vaut une gloire éternelle (« Fra le stragi e fra le morti »).

Pendant ce temps, dans le camp macédonien, Lisaura et Roxane, deux Princesses amoureuses d’Alexandre, craignent pour la vie de leur amant. Le Roi des Indes, Tassile, annonce alors aux deux princesses le succès de l’Empereur. Il regrette la joie de Lisaura, dont il est lui-même amoureux. Loin de s’en émouvoir, cette dernière se voue à l’amour (« Quanto dolce Amor sarìa »), tandis que Roxane se promet d’écarter sa rivale (« Lusinghe più care »). Tassile, de son côté, reste partagé entre sa loyauté pour son Empereur et la rivalité amoureuse qui l’oppose à lui (« Vibra cortese amor »).

Alexandre recueille les louanges de ses soldats rassemblés autour de lui (« Fra le guerre e le vittorie »). Alors qu’il se rapproche de Roxane, Lisaura fulmine de jalousie. Mais lorsqu'il cherche à calmer cette dernière, Tassile lui indique la fureur de Roxane pour l'éloigner de Lisaura. Alexandre partant à la recherche de Roxane, Lisaura fulmine, prise de jalousie (« No, più soffrir non voglio »). A l’écart, Roxane se lamente également de l’inconstance d’Alexandre (« Vilipese bellezze, Lusinghe disprezzate »). Ce dernier la rejoint et la rassure sur son amour pour elle (« Men fedele, men costante »). Mais Roxane ne sait si elle doit le croire ou non (« Un lusinghiero dolce pensiero »).

De leur côté, les Princes Cleone et Leonato discutent avec le Prince Clitus. Bien que Leonato affiche une amitié indéfectible à l’Empereur (« Pregi son d'un alma grande »), Clitus, ayant été offensé, cherche à le convaincre des abus de ce dernier (« A sprone, a fren leggiero »).

Dans le Temple de Jupiter, Alexandre est honoré comme le fils du Roi des dieux (« Al Magnanimo, al Forte, al Vincitore »). Seul Clitus refuse de se prosterner devant l’Empereur, provoquant sa fureur. Lisaura et Roxane s’emploient à calmer Alexandre (« Placa l’Alma, Quieta il petto »).Celui-ci se laisse infléchir, s’accordant un répit amoureux (« Da un breve riposo »).

Acte II

Seule, Roxane exprime sa détresse devant l’infidélité d’Alexandre, dont le cœur est partagé, avant de s’endormir (« Solitudine amate In cui sfogarmi lice »). Alors que Lisaura l’observe cachée, Alexandre s’approche de Roxane, amoureux. Ne pouvant contenir sa jalousie, Lisaura se révèle à lui. Alexandre professe alors son amour à cette dernière, provoquant la jalousie de Roxane, qui s’est réveillée mais feint de dormir encore. Lisaura rappelle à l’Empereur les paroles d’amour qu’il prononçait peu avant pour Roxane. Le repoussant, elle s’en va. Aussitôt, Alexandre revient vers Roxane, qui après un reproche identique, le laisse seul (« Eccola in preda al sonno »). De son côté, Lisaura rumine l’affront subi par son amour, quand Tassile paraît et la supplie de le préférer à l’infidèle Empereur (« Sempre fido e disprezzato »). Seule à nouveau, Lisaura s’accroche à l’espoir d’être aimée d’Alexandre, bien qu’elle sache cet espoir vain (« Che tirannia d’Amor ! »). Roxane, retrouvant Alexandre, lui affirme vouloir reprendre sa liberté, tout en promettant de lui revenir s’il lui promettait de lui être fidèle (« Alla sua gabbia d’Oro »). Vexé, Alexandre se promet d’oublier Roxane (« Risolvo abbandonar la Bella che mi sprezza »), aidé en cela par Lisaura, qui jubile (« La Cervetta nei lacci avvolta »).

Assis sur son trône, Alexandre réunit les princes de sa cour, afin de les récompenser de leurs glorieux exploits. Une nouvelle fois, Clitus s’oppose à lui : tandis qu’Alexandre s’apprête à le tuer, des conspirateurs font s’effondrer une colonne sur le trône. Indemne, Alexandre fait arrêter Clitus qu’il soupçonne d’être responsable de cette trahison. Pensant qu’Alexandre a été tué, Roxane est effondrée. Alors que Leonato annonce un soulèvement du peuple, l’Empereur apparaît à Roxane et lui promet fidélité (« Il Cor mio ch’è già per te »). Tandis qu’Alexandre part au combat, Roxane constate la victoire de son amour sur sa jalousie (« Dica il Falso, dica il Vero »).

Acte III

Dans sa prison, Clitus se lamente sur son sort (« Sfortunato è il mio valore »). Leonato vient alors le libérer, enfermant Cleone, qui était chargé de sa garde, à sa place. Ce dernier se promet d’obtenir vengeance (« Sarò qual vento »).

Tandis que la jalousie de Lisaura s’apaise (« Sì m’è caro imitar quel bel fiore »), Roxane exulte d’avoir conquis le cœur d’Alexandre (« Brilla nell’Alma »). Souhaitant mettre fin à toute incertitude, Lisaura interroge Alexandre. Celui-ci lui annonce avoir choisi Roxane, tandis qu’elle épousera le fidèle Tassile. Faisant passer le bonheur de son amant avant le sien, Lisaura accepte sa décision (« L’Amor, che per te sento »). Alexandre annonce également sa décision à Tassile, qui l’assure de son soutien pour combattre les conspirateurs. S’apprêtant à partir au combat, Alexandre assure Roxane de son amour (« Pupille amate Voi m’insegnate »). Laissée seule, celle-ci prie les dieux de préserver son amant (« Tempesta e Calma Sento nell’Alma »).

Face au peuple qui se soulève (« D’un fiero nel soglio »), Alexandre s’affiche, superbe, désarmant ses ennemis. Les conspirateurs reconnaissent sa puissance : en signe de sa grandeur, l’Empereur les pardonne (« Prove sono di Grandezza »). Réconciliées, les deux rivales, Lisaura et Roxane, célèbrent la fin de la guerre civile (« Spegni o Supremo Regnator de’ Numi ») : l’une épouse Tassile tandis que la seconde obtient la main d’Alexandre. Tous célèbrent cet heureux dénouement (« In generoso Onor Bella ti cede il Cor »).